血小板表面具有复杂的血型抗原，这些抗原能通过输血、妊娠及药物等免疫因素而产生相应的抗体，从而导致一系列临床病症，如血小板输注无效症（PTR）、新生儿同种异体免疫血小板减少症（NAIT）、输血后紫癜（PTP）、被动性同种异体免疫血小板减少症（PAT）及移植相关同种异体免疫血小板减少症（TAAT）等。根据血小板表面血型抗原的分布情况可分为两大类，一类是血小板相关性抗原，这类抗原是与其他细胞或组织共有的抗原，如ABH抗原、HLA-I类抗原及CD36等；另一类是血小板特异性抗原（HPA），其主要存在于血小板膜的糖蛋白分子上，在其他组织细胞则很少存在。下面对血小板特异抗原（HPA）及血清学方面做一简要的介绍。

1 血小板特异性抗原HPA

1.1 目前发现的HPA

HPA主要分布于血小板膜糖蛋白复合物GPIIb/IIIa、GPIa/IIa、GPIb/IX/V及CD109上。HPA由常染色体双等位共显性基因构成，其基因遗传多态性除HPA-14bw抗原是由于1 901-1 911位置上AAG 3个碱基缺失产生外，其他抗原均由于单核苷酸取代而产生，即单核苷酸多态性。1959 年第一个人类血小板特异性抗原（HPA）被鉴定，至今由人血清免疫抗体已确定的HPA共36个。按2003年血小板命名委员会（PNC）制定的HPA命名原则和认可新抗原的标准，目前除Mou^a抗原未达到命名要求外，其余35个血小板抗原已被正式命名（表1），其中12个抗原被归为6个双等位基因系统（HPA-1,-2,-3,-4,-5,-15），其余抗原未达到系统标准。

1.2 HPA 抗原国际命名原则及认可新抗原的标准

人类血小板抗原（HPA）命名系统在1990年被采用，于2003 年由国际输血协会（ISBT）和国际血栓和止血协会（ISTH）联合成立的血小板命名委员会（PNC），对该命名法进行再次修订，对HPA 进行了系统命名，建立命名原则和认可新抗原的标准。在此命名方式中，以HPA为字头，然后连接数字表示。在由2 个对偶抗原组成的遗传系统中，对偶基因分别用英文小写字母a 和b 表示。字母a 代表其中基因频率大于50 %的等位基因，字母b 代表基因频率小于50 %的另一等位基因。如果某血小板抗原的对偶抗原尚未被发现，将给予暂时命名,在等位基因数字后加后缀w 表示，如HPA-6bw ，HPA-7bw 等。只有在2 个对偶抗原全被检测出来后，才能被称为系统。

对于HPA新抗原的认定，PNC 提出如下5 条标准：（1）必须阐明该同种抗原的遗传学基础,提供相应基因的基因组DNA 序列资料，或至少是cDNA 序列资料; （2）必须使用特异性蛋白免疫分析方法,阐明基因突变和相应蛋白之间的关联; （3）至少有2 个参比实验室证实血清学和分子生物学的鉴定结果; （4）必须提供该抗原的群体资料,如果提供家系资料将更有价值; （5）应尽可能提供血样以建立细胞株。

1.3 HPA的分型

对HPA表型分型，由于难以获得高质量，特异性的HPA抗血清，而且目前用于的HPA分型的可靠血清学试剂比较稀有，所以很难系统确定HPA表型型别。随着分子生物学技术的发展，目前对HPA的分型主要是进行基因分型，基因分型技术成熟，广泛被各实验室运用于基因型别的筛查和建立已知HPA基因型的血小板供者库。

目前用于HPA基因分型的方法有：①序列特异性引物PCR （PCR-SSP）：由于其操作简便，耗时少，可在同一反应条件下实现多个HPA型别的分型，是目前HPA基因定型中最常用的技术；②测序技术（SBT）：对DNA或基因进行碱基序列的测定，该法准确率高，可测定未知序列及对突变进行定位和鉴定；③限制性片断长度多态性分析（PCR-RFLP）：该法是利用限制性内切酶酶解相应位点扩增产物，不需探针杂交，但被测的HPA基因需有合适的限制性酶切位点，此方法较PCR-SSP 增加了内切酶水解步骤，如果酶解不完全将得错误结果。此外,并非每个HPA 等位基因都有适当的酶切点；④ TaqMan技术：是一种实时PCR技术，优点是敏感度高，可自动记录分析结果，但需要使用特殊的即时PCR 扩增仪以及某些荧光标记引物专利产品，费用较高。

2. 血小板特异性抗体

2.1抗-HPA抗体引起的疾病

抗-HPA抗体是同种血小板抗体，其产生与其他同种血小板抗体一样一般由输血、妊娠或骨髓移植等免疫刺激而产生。该抗体可引起的疾病主要有：(1) 新生儿同种免疫血小板减少症（neonatal alloimmue thrombocytopenia,>）: 也称胎母同种免疫血小板减少症（feto-maternal alloimmune thrombocytopenia，FMAIT），母亲通过妊娠而被免疫，产生IgG同种抗体，通过胎盘破坏胎儿血小板。约有30%病例发生在初次妊娠，有既往史的妇女再次妊娠时复发，病情加重。该病病情变化大，许多病例为无症状的血小板减少，但超过10%的病例发生颅内出血及导致许多新生儿发生神经损害或死亡。在白种人中，80–90%病例由抗-HPA-1a抗体引起，5–15%的病例由抗-HPA-5b抗体引起，余下的由其他HPA抗体引起。母亲也同样可能被HLA抗原免疫，但无证据证明HLA抗体可引起NAIT；(2) 输血后紫癜（Post-transfusion purpura，PTP）：该病主要发生于中年或老年妇女，患者之前曾通过妊娠或输血而被同种抗原免疫。大多数病例与抗-HPA-1a抗体有关；(3) 血小板输注无效症(Refractoriness to platelet transfusion, PTR)：当患者随机输注ABO同型血小板两次后血小板计数无增长称之为PTR。大部分PTR并不是由免疫产生，然而，有26-71%长期输注血小板的患者会产生HLA抗体，大约10%的患者同时具有HLA抗体和HPA抗体。目前仅有少量的相关小研究建立在HPA特异性抗体在这一临床病症发生中的作用，但最大的共同点是这些研究均为抗体对抗低频率同种抗原HPA-1b，-5b，-2b。

2.2 血小板抗体的检测

目前较常用于HPA抗体检测的技术有：(1) Flow cytometry流式细胞术：该法多用于检测血小板输注效果和血小板交叉配型等，其缺点是不能区分血小板抗体的特异性；(2) 混合被动红细胞凝集试验（MPHA）：该法属于第二代血小板免疫学检测方法，多用于血小板交叉配血，其局限性是不能区分血小板抗体的特异性；(3) 血小板抗原单克隆抗体特异性免疫固定检测技术（MAIPA）：该技术及其改良法是目前血小板抗体检测的最广泛方法，该法敏感，能区分混合抗体，近年来，这一技术使我们发现了许多新的血小板抗原；(4) ELISA改良的抗原捕获ELISA（MACE）。

               表1. 被PNC正式命名的血小板特异性抗原一览表