LpMab-12 Established by CasMab Technology Specifically Detects Sialylated OGlycan on Thr52 of Platelet Aggregation-Stimulating Domain of Human Podoplanin

作者：Kato Y, Ogasawara S, Oki H, Goichberg P, Honma R, Fujii Y, et al.

翻译：蒋丽红

来源：PLoS One, 2016,11(3):e0152912. doi: 10.1371/journal.pone.0152912.

[摘要]

平足蛋白（Podoplanin，PDPN），也被称为Aggrus，在其N末端具有三个重复串联的诱导血小板聚集域（PLAG）。在PLAG域中，PLAG3 Thr52上的唾液酸化O聚糖是结合到C型凝集素样受体2（CLEC-2）和人类PDPN（hPDPN）中诱导血小板聚集的关键部位。虽然已有多种抗-hPDPN单克隆抗体（mAb）产品，但是目前还未见针对含有糖基化Thr52抗原表位的特异性mAb的报道。我们最近建立的CasMb技术是针对糖基化膜蛋白开发的单克隆抗体。在此，我们报道建立了一种新的抗-糖肽单克隆抗体（GpMab），LpMab-12。应用LpMab-12通过流式细胞技术检测内源性hPDPN。免疫组化分析亦表明，淋巴管内皮细胞和癌细胞表达的hPDPN都能通过LpMab-12清楚的标记。LpMab-12的最小抗原表位已被确定为hPDPN的Asp49–Pro53。此外，LpMab-12h与合成糖肽hPDPN反应，对应于38~54氨基酸(hpp3854: 38-EGGVAMPGAEDDVVTPG-54)，其携带Thr52上的α2-6唾液酸化N-乙酰基-D-半乳糖胺(GalNAc)。LpMab-12不能识别非唾液酸化的GalNac-粘附糖肽，表明Thr52上的唾液酸化GalNAc是LpMab-12与hPDPN结合的必需部位。因此，LpMab-12可作为一种新的诊断工具用于确定hPDPN是否具有唾液酸化的Thr52，是一个与CLEC-2相关的针对hPDPN翻译后修饰关键部位的位点特异性单克隆抗体。