Novel method for simultaneously detecting HPA and HLA antibodies using Luminex microbeads.

作者:Tao S, Chen S, Hong X, He J, Zhu F.

来源:J Transl Med. 2019 Aug 5;17(1):249. doi: 10.1186/s12967-019-2002-4.

翻译:李丽兰

[摘要]

背景

针对人类血小板抗原（HPAs）和人类白细胞抗原（HLA）的抗体涉及多种免疫介导的血小板异常疾病。检测这些抗体在这些疾病的诊断和治疗中是至关重要的。本研究的目的是建立一种使用Luminex微珠技术同时检测HPA-1，HPA-2，HPA-3，HPA-5和HLA抗体的新方法。

方法

特异性针对血小板糖蛋白和HLA-I类分子的单克隆抗体分别偶联到Luminex微珠。使用以下抗体验证Luminex平台的方法的特异性:抗-HPA-1a，抗-HPA-2b，抗-HPA-3a，抗-HPA-5a，和抗-HLA阳性样本。使用以下抗体的系列稀释度（从完全到1/1024）评估方法的灵敏度:抗-HPA-1a，抗-HPA-3a标准血清，和抗-HPA-5a阳性血清。使用建立的Luminex方法检测所收集的来自于36例怀疑具有HPA或HLA抗体的新生儿同种免疫血小板减少症（NAIT）患者的血清样本和8例来自于ISBT血小板研讨会的血清样本。

结果

Luminex方法检测到已知样品中的所有抗体。Luminex方法的灵敏度在抗-HPA-1a，抗-HPA-3a，和抗-HPA-5a的检测中分别为1:512,1:64,1:128。Luminex方法的灵敏度高于血小板单克隆抗体特异性免疫固定试验（MAIPA）。在含有多血小板抗体或者针对HPA和HLA的混合抗体的样本中未观察到交叉反应。44个血小板疾病样本的检测结果与MAIPA检测结果一致。

结论

偶联单克隆抗体的Luminex微珠可成功用于同时检测HPA和HLA抗体，尤其在HPA抗体检测中具有高灵敏度。

关键词

HLA抗体；HPA抗体；Luminex方法；MAIPA；